Metode de determinare a glucidelor din sânge și alte fluide biologice.

  1. metode enzimatice
  2. cromatografice
  3. colorimetric

Metode bazate pe proprietățile reducătoare ale glucidelor. Metodele sunt împărțite în două grupe majore: metode enzimatice și clorinimetrice.

Metode enzimatice: Determinarea cantitativă.

Metoda glucozei oxidazei: Glucoza este oxidată în prezența glucozei oxidazei de către oxigenul din aer. Ca urmare a reacției, se formează acid gluconic și peroxid de hidrogen. În a doua etapă a reacției, este implicată peroxidaza, care catalizează transferul ionului hidrogen la peroxidul de hidrogen, prin care forma incoloră a cromogenului se transformă într-un compus colorat.

glucoză + H2O + O2 ––––––- → acid gluconic + H2O2

H2O2 + cromogen-H2 ––––––- → 2H2O + cromogen

Cei mai utilizați cromogeni sunt o-ortodianizidina, fenol-4-aminofenazonă sau PAP. Intensitatea culorii obținute este proporțională cu concentrația de glucoză. Culoarea este spectrofotometrică, cel mai adesea cu o lungime de undă de 546 nm.

Metoda hexokinazei glucoză-6-fosfat dehidrogenază:

Această metodă se bazează pe un test optic în două etape. Este cea mai specifică și sensibilă metodă.

Factori care afectează glicemia:

1) material de cercetare

- concentrația de glucoză din sângele venos este mai mică decât cea din capilar cu aproximativ 0,1 - 0,3 mmol/l

- plasmă și ser, concentrația este mai mare decât cea a eritrocitelor 0,55 - 1,11 mmol/l

- șederea materialului prelevat mai mult de 3 ore la temperatura camerei duce la o scădere a concentrației datorită cursului glicolizei glucoza scade cu 10-15%

- timpul în care a fost luat materialul de testat - concentrația de glucoză prezintă fluctuații zi-noapte, care necesită examinare dimineața pe stomacul gol în pace mentală și fizică completă, la 8-10 ore după ultima masă

2) o dietă bogată în alimente cu carbohidrați la persoanele sănătoase duce la scăderea nivelului de zahăr din sânge

3) activitate fizică

Valori de referinta:

glicemiei
Interpretarea clinică a rezultatelor:

Creșterea glicemiei se numește hiperglicemie și scăderea hipoglicemiei. Nivelul zahărului din sânge este afectat de mulți factori, dintre care cei mai importanți sunt:

1) Procese fiziologice

- absorbția glucozei intestinale

- degradarea glucozei în țesuturi (glicoliză)

- stocarea glucozei în ficat și mușchi sub formă de glicogen (glicogenogeneză)

- degradarea glicogenului hepatic în glucoză (glicogenoliză)

- conversia glucozei în grăsimi și proteine

- excreția zahărului în urină

2) Mecanisme de reglementare

Insulină. Scade nivelul zahărului din sânge prin stimularea intrării glucozei în celule, ceea ce duce la scăderea nivelului său în plasmă. Acest lucru se face prin legarea insulinei de receptori specifici de pe suprafața celulelor sensibile la insulină (grăsime și mușchi).

Adrenalină - crește glicemia. Activează fosforilaza hepatică și musculară, care îmbunătățește glicogenoliza și inhibă sinteza glicogenului.

Glucagon - crește glicemia. Stimulează glicogenoliza datorită fosforilazei hepatice activate.

Hormonul somatotrop - crește glicemia.

Glucocorticoizi - cresc glicemia.

Hormoni tiroidieni - cresc glicemia

Somatostatină - crește glicemia. Este secretat în celulele D ale pancreasului.

Menține o concentrație constantă de glucoză în sânge prin mecanisme de reglare autohomeostatice. Acest lucru se face în principal prin modificarea permeabilității celulare a glucozei.

Nivelul zahărului din sânge se modifică atunci când:

I condiții fiziologice

- după masă (hiperglicemie alimentară). Excesul de zahăr după completarea rezervelor de glicogen trece în sânge sub formă de glucoză. Când pragul renal este depășit, acesta apare în urină.

- stres și tensiune emoțională, supraîncălzire, efort fizic, sarcină

- în caz de post prelungit și la nou-născut

II Condiții patologice

- diabet zaharat, concentrație crescută de adrenalină, tirotoxicoză, acromegalie, infarct miocardic, arsuri, pancreatită cronică, tumori cerebrale, meningită, encefalită, hemoragie cerebrală, toxicoză etc.

- sinteza crescută a insulinei, resorbția intestinală afectată, glicogenoză, tumori ale cortexului suprarenal, carcinom și hiperplazie a pancreasului, pancreatită acută, afecțiuni renale, hepatită virală, ciroză hepatică etc.