EliSpot - diagnosticul bolii Lyme, coinfecțiilor și altor agenți patogeni intracelulari

elispot

O provocare serioasă pentru medicina modernă este diagnosticul precoce al infecțiilor cronice intracelulare (intracelulare), printre care cele mai populare sunt: ​​Borrelia (boala Lyme), virusul Epstein bar, citomegalovirusul, Chlamydia, virusurile herpesului, Mycoplasma și Asper. Interesul a crescut semnificativ, pe lângă descoperirea unei asociații între o serie de boli autoimune semnificative sau dificil de identificat cu agenți patogeni intracelulari, cum ar fi asocierea tiroiditei Hashimoto și a altor boli autoimune cu virusul Epstein bar, scleroza multiplă cu Borelia și virusul Epstein bar, boli de citomegalovirus, diaree cronică cu Yersinia etc.

Testul serologic standard pentru nivelurile de anticorpi IgM/IgG are o sensibilitate de 50% la infecția timpurie (adică în 50% din cazuri este fals negativ). De asemenea, este important ca această metodă să nu ofere informații exacte despre eficacitatea tratamentului, deoarece nivelurile de anticorpi rămân deseori ridicate timp de ani de zile după ce infecția a fost eliminată.

Având în vedere că imediat după contactul cu un microorganism, începe activarea specifică antigenului a celulelor T, rezultând o producție crescută de citokine. Pe fondul celorlalte activități ale acestora, citokinele determină răspunsul celulelor B și sinteza anticorpilor. Numai după eliminarea infecției, populația de celule T activate scade, ceea ce reduce secreția de citokine. Prin urmare, un test care monitorizează activitatea celulelor T oferă informații mai precise despre prezența infecției active decât un test cu anticorpi.

EliSpot se numără printre cele mai sensibile (84%) și metode specifice pentru testarea activității celulelor T și B. Oferă atât informații calitative, cât și cantitative despre celulele care secretă citokine sau anticorpi după o stimulare adecvată. Acest lucru îl face o metodă de diagnostic relativ rapidă, extrem de eficientă și foarte specifică (94%). Cu alte cuvinte, poate detecta chiar și o singură celulă T activă într-un eșantion de 100.000 de celule.

EliSpot a fost dezvoltat de Cecil Cherkinski în 1983 ca metodă de monitorizare a răspunsului imun la oameni și animale. Aparține sistemelor IGRA (Interferon-Gamma-Release Assay).

EliSpot este foarte asemănător cu ELISA și se bazează pe același principiu imunochimic sandwich. Principala diferență este că ELISA determină concentrația totală de citokină sau anticorp secretat, în timp ce EliSpot detectează cantitatea de celule activate care secretă derivați de semnalizare. Se recomandă ca EliSpot să fie utilizat în plus față de ELISA, deoarece este de 200 de ori mai sensibil și răspunde dacă o infecție activă este de fapt prezentă. În comparație cu analiza RT-PCR, care izolează ARNm, EliSpot este mai sensibil deoarece detectează cantitatea de celule activate în primele etape ale infecției.

Lupta împotriva bolii Lyme este unul dintre cele mai fierbinți subiecte de sănătate în acest moment. Depistată într-un stadiu incipient, boala este ușor tratată fără a provoca daune permanente. Dar există obstacole în calea diagnosticării precoce:

  • Testele serologice standard durează până la câteva săptămâni. Titrul anticorpului poate fi negativ la începutul infecției atunci când bacteriile sunt în fluxul sanguin și poate fi pozitiv și atunci când bacteriile sunt deja distribuite în țesuturi sau absente.
  • Erupția tipică după o mușcătură (Erythema migrans), de fapt, deseori trece neobservată sau nu apare întotdeauna.
  • Datorită implicării multor sisteme, simptomele imită alte boli și sunt trecute cu vederea. (Exemplu: simptome asemănătoare gripei, artrită, cefalee, probleme de memorie și concentrare, dureri musculare, furnicături, neuropatie, scleroză multiplă)

Faptele arată că poate dura câteva luni sau mai mult între diagnostic și începutul tratamentului. Dacă nu este tratată, boala Lyme progresează către boli grave invalidante ale sistemului nervos, cardiovascular și musculo-scheletic. Borrelioza modifică sistemul imunitar, reducând celulele CD57 +, motiv pentru care este adesea combinată cu alte coinfecții (Anaplasma și Erlichia, Bartonella henselae, Babesia microti, retrovirusuri etc.).

Linii directoare de diagnostic

EliSpot este utilizat în diagnosticul următorilor agenți patogeni:

  • Borrelia burgdorferi, inclusiv următorii antigeni:
  • Borrelia burgdorferi antigen complet
  • Amestec de peptide de la Borrelia burgorferi
  • Borrelia burgdorferi LFA-1
  • Borrelia miyamotoi
  • Anaplasma și Erlichia
  • Bartonella henselae
  • Babesia microti
  • Chlamydia pneumoniae
  • Chlamydia trachomatis
  • Mycoplasma pneumoniae
  • Yersinia
  • Virusul Epstein Barr (EBV)
  • Virusul Herpes Simplex I & II (HSV 1/2)
  • Citomegalovirus (CMV)
  • Virusul Varizella Zoster (VZV)
  • Candida albicans
  • Amestec de peptide Aspergillus 1 și 2

Semnificația clinică EliSpot

  • boli oncologice
  • boli autoimune (colagenoză, poliartrită reumatoidă, scleroză multiplă, tiroidită Hashimoto, vasculită, cu ANA crescută, anticorpi CCP, ANCA)
  • boli infecțioase (TB, boala Lyme și coinfecții, în special la sero-negative sau la pacienții cu simptome clinice și pentru confirmare la pacienții seropozitivi fără manifestare clinică)
  • alergii,
  • transplant de organe și
  • urmărirea tratamentului.

Viitorul testului constă în determinarea răspunsului specific antigenului în celulele sanguine periferice după vaccinare.

Testul este un test de sânge, efectuat de luni până miercuri.