Cercetare

Tuberculoza este o boală infecțioasă respiratorie contagioasă cauzată de micobacterii, care sunt de trei tipuri: Mycobaterium tuberculosis - cea mai frecventă, M. bovis și M. africanum.

Infecția cu tuberculoză include atât forme active, cât și forme latente. Tuberculoza latentă apare atunci când o persoană este expusă la M. tuberculosis și sistemul imunitar al corpului controlează și limitează infecția, dar nu reușește să o eradice. Se estimează că aproximativ 10% dintre persoanele cu tuberculoză latentă progresează la forma activă în timpul vieții. Cauzele asociate cu reactivarea infecției latente includ infecția cu HIV, tratamentul cu antagoniști ai TNFα și altele. Din acest motiv, diagnosticul tuberculozei latente este un pas important în prevenirea reactivării infecției, în special la persoanele cu risc ridicat. Tratamentul tuberculozei latente poate reduce semnificativ riscul progresiei către forme active.

Ce necesită cercetarea?

Suspiciunea prezenței unei forme active sau latente de tuberculoză, contactul cu un pacient cu o formă activă de tuberculoză, precum și monitorizarea activității bolii și efectul tratamentului la pacienții cu infecție tuberculoasă deja diagnosticată.

Testul este recomandat de un medic în prezența unor simptome precum: slăbiciune și oboseală, febră slabă, transpirații nocturne, scădere în greutate, tuse prelungită cu spută cu caracteristici diferite.

Care este scopul studiului?

Testul QuantiFERON TB Gold este un test in vitro util în diagnosticarea infecției cu Mycobacterium tuberculosis atât pentru formele latente, cât și pentru cele active. În Comunitatea Europeană, testul este certificat pentru a fi utilizat în aceleași situații în care este indicat testul pentru tuberculină (Mantoux). Testul măsoară intensitatea răspunsului imun celular la antigeni care simulează proteinele produse de micobacterii tuberculoase.

Deși utilizată pe scară largă, analiza tuberculinei are unele limitări.

Spre deosebire de testul Mantoux, rezultatele testului QuantiFERON TB Gold nu sunt afectate de vaccinarea BCG, iar infecțiile micobacteriene non-tuberculoase sunt mai puțin afectate. Efectele secundare ale hipersensibilității care pot apărea în testul Mantoux sunt, de asemenea, eliminate cu QuantiFERON TB Gold. De asemenea, rezultatele testului QuantiFERON TBC sunt mult mai obiective, fără erori de citire și interpretare

Ce determină studiul?

Sângele heparinat al pacientului a fost incubat timp de 16-24 ore împreună cu un amestec de peptide sintetice care simulează proteinele specifice tuberculozei: ESAT-6 și CFP-10. Aceste proteine ​​sunt produse de toate tulpinile patogene de M. tuberculosis. și tulpini patogene de M. bovis și sunt absente în tulpinile incluse în vaccinul BCG, precum și în majoritatea micobacteriilor netuberculoase, cu excepția M. kansasii, M. szulgai și M. marinum. Astfel, QuantiFERON este mai specific decât testul tuberculinei pentru detectarea infecției cu M. tuberculosis. Dacă celulele T de memorie pentru aceste proteine ​​sunt prezente în proba de sânge (ceea ce s-a întâmplat în cazul unei infecții cu mulți ani în urmă), aceste celule vor produce interferon γ în contact cu antigenul specific.

Cuantificarea γ-interferonului eliberat în plasmă se realizează printr-un test imunosorbent legat de enzimă foarte sensibil (ELISA), iar rezultatele sunt exprimate în UI (unități internaționale) per mililitru. Sunt necesare controale pozitive și negative pentru a asigura validitatea testului. Controlul pozitiv este fitohemaglutinina (substanță mitogenică universală) (Mitogen), iar controlul negativ (Nil) este serul fiziologic (utilizat ca martor pentru a măsura nivelul bazal al γ-interferonului). Prin urmare, pentru ca testul să fie valid, valoarea obținută pentru controlul Nil negativ trebuie să fie ≤ 8 UI/ml, iar valoarea obținută pentru controlul mitogen, din care se reduce valoarea antigenului Nil (Mitogen - Nil), trebuie să fie ≥ 0,5 UI/ml.

În versiunea actuală îmbunătățită a testului - QuantiFERON TB Gold Plus - pentru antigenele tuberculozei, sunt utilizate două tuburi, fiecare dintre acestea conținând peptide antigenice care imită proteinele ESAT-6 și CFP-10. Primul tub (antigen TB1) conține peptide care sunt concepute pentru a induce un răspuns imun pe baza limfocitelor ajutătoare T CD4 +, în timp ce al doilea tub (antigen TB2) conține un set suplimentar de peptide care vizează producerea unui răspuns imun prin CD8 + T citotoxic limfocite.

În cursul natural al infecției cu tuberculoză, celulele T CD4 + joacă un rol semnificativ în controlul imunologic prin producerea de γ-interferon. Cu toate acestea, datele actuale susțin implicarea gazdei în răspunsul imun la infecția cu TB și limfocitele T CD8 +, prin producerea de γ-interferon, precum și alți factori solubili care activează macrofagele pentru a inhiba creșterea micobacteriilor, i. distruge celulele infectate sau provoacă liza directă intracelulară a microorganismelor. Deși limfocitele T CD8 + sunt specifice antigenelor, M. tuberculoza a fost găsită atât la persoanele cu tuberculoză latentă, cât și la tuberculoza activă, cele care vizează ESAT-6 și CFP-10 fiind mai frecvente în cazurile de tuberculoză activă și pot fi asociate cu expunerea recentă la agentul patogen.

În plus, limfocitele care produc γ-interferon CD8 + T au fost raportate și la persoanele cu coinfecție activă cu tuberculoză și HIV, precum și la copiii cu infecție cu tuberculoză.

Cantități de γ-interferon corespunzătoare celor două amestecuri antigenice (AgTB1 și AgTB2) au fost, de asemenea, raportate în rezultat.

Când să faci această cercetare?

Testul QuantiFERON poate fi utilizat în toate situațiile în care testul tuberculinei (Mantoux) este de obicei utilizat:

  • suspiciune clinică și radiologică de tuberculoză activă;
  • contactele pacienților cu forme infecțioase de tuberculoză;
  • screeningul persoanelor cu risc ridicat: personalul din unitățile sanitare și instituțiile medicale, persoanele din mediul igienic deficitar etc.

Notă: QuantiFERON TBC înlocuiește testul tuberculinei (Mantoux) și, prin urmare, ambele teste nu trebuie utilizate în același timp.

Testul cuantiferon poate fi utilizat și pentru monitorizarea și urmărirea pacienților cu tuberculoză activă. Există câteva studii care arată utilitatea potențială a testului în evaluarea eficacității tratamentului tuberculostatic prin monitorizarea rezultatului testului QuantiFERON TB Gold, care se modifică în timp. Evaluarea rezultatului testului QuantiFERON la două luni după începerea terapiei poate avea o valoare prognostică semnificativă asupra eficienței fazei de terapie intensivă. Poate fi utilizat și înainte de terapia imunosupresoare care suprimă sistemul imunitar (de exemplu, cu anticorpi anti-TNFα, citostatice) sau înainte de transplantul de organe pentru a exclude infecția latentă cu M. Tuberculosis, care se poate reactiva în timpul terapiei.

Testul TBC Gold Plus are o specificitate generală: 97,6% (95,6-98,8%) și o sensibilitate generală la tuberculoza activă: 95,3% (90,9-97,9%).

Puteți solicita acest test online

Comandați-vă cercetarea online și economisiți 10% din valoarea sa

tuberculoză

Pregătirea înainte de examinare

Terapia imunosupresivă trebuie întreruptă cu cel puțin 14 zile înainte de studiu. Rezultatul testului nu este afectat de alimente, apă sau alte băuturi.

Repetiţie

sânge venos. Tuburile pentru acest test sunt speciale - cu heparină cu litiu. Sângele trebuie să ajungă în laborator în decurs de 12 ore (maximum 16 ore) timp în care este depozitat la temperatura camerei. Răcirea sau congelarea probei este contraindicată. La internarea în laborator, sângele a fost imediat incubat la 37 ° C timp de 16-24 de ore.

Metodă

Valori de referinta

Rezultatul este considerat negativ dacă sunt îndeplinite următoarele condiții:

  1. Cantitatea de γ-interferon eliberată după stimulare cu cele două amestecuri antigenice (AgTB1-Nil și AgTB2-Nil) 8 UI/ml;
  2. Mitogen - Nil ≥ 0,5 UI/ml.

Dacă proba a fost colectată și transportată în condiții adecvate, lipsa validării controlului mitogen indică cel mai probabil imunosupresia severă cauzată de SIDA, o altă boală gravă sau tratamentul în curs cu medicamente imunosupresoare (doze mari de corticosteroizi, antagoniști ai TNFα, medicamente utilizate). la pacienții cu transplant de organe). Lipsa validării controlului negativ (Nil) apare în prezența γ-interferonului nespecific crescut (cel mai frecvent) sau asociat cu imunizări.

Valoarea prognostică a testului depinde de prevalența infecției cu M. tuberculosis la populația studiată. Fiecare rezultat trebuie interpretat în contextul clinic și epidemiologic al pacientului respectiv. Rareori este posibil să se obțină un rezultat fals pozitiv la pacienții cu infecții cu micobacterii non-tuberculoase precum M. kansasii, M. szulgai și M. marinum

Limitări și caracteristici ale rezultatelor

Deși este utilizat pe scară largă, acest test are unele limitări. Spre deosebire de testul Mantoux, rezultatele testului QuantiFERON TB Gold nu sunt afectate de vaccinarea BCG, iar infecțiile micobacteriene non-tuberculoase sunt mai puțin afectate. Efectele secundare, cum ar fi alergiile care pot apărea în testul Mantoux, au fost, de asemenea, eliminate cu QuantiFERON TB Gold. De asemenea, rezultatele testelor QuantiFERON TBC sunt mult mai exacte, fără erori în citirea și interpretarea lor.